1- Diluir o antígeno: diluir o antígeno com solução salina fisiológica até ao dobro da concentração final (preparada de acordo com uma dose de antígeno de 1 ml por injecção).
•(1) Para antígenos de proteína de subunidade com imunogenicidade fraca, 800 μg por injecção.
•(2) Para vírus inteiros inactivados ou bactérias inteiras e antígenos de partículas semelhantes a vírus com forte imunogenicidade, 400 μg por injecção.
•(3) Para antígenos de pequenas moléculas conjugados a proteínas transportadoras, 500 μg por injecção. (A dosagem real deve basear- se em dados preliminares e na experiência da empresa.)
2. Misturar o adjuvante: misture bem o adjuvante (recomenda- se utilizar uma seringa para misturar repetidamente) e em condições estéreis,tomar a quantidade necessária (1 ml por injecção) e misturar rapidamente com o antígeno numa(Uma ligeira precipitação do adjuvante é normal; certifique- se de misturar completamente com o antígeno e injetar imediatamente.)
3Método de injecção: Injectar no músculo da perna, administrando 2 ml por cabra. (O método de injecção pode seguir as operações de rotina da empresa.)
•(1) É normal uma ligeira precipitação do adjuvante após mistura com o antígeno.
•(2) Alternativamente, a injecção subcutânea ou intradermal pode ser escolhida com base nos hábitos experimentais.
4Imunização de reforço: no 10. o - 14. o dia, administrar uma injecção de reforço com a mesma dose e método (o momento da segunda injecção deve ser determinado com base no tipo de antígeno).Prepare e utilize sempre o adjuvante e o antígeno misturados recentemente, injectando- se no mesmo local da imunização inicial. (Sigam o programa de imunização real da empresa para as imunizações de reforço.)
5Detecção de anticorpos: a IgG pode ser detectada no 14o dia e uma pequena amostra de sangue pode ser coletada no 21o dia para teste ELISA.As conclusões dos dados reais devem seguir os resultados experimentais.O título de anticorpo pode atingir o seu pico. Em seguida, o sangue inteiro pode ser coletado, ou a imunização do desafio do antígeno e a fusão de células do baço podem ser realizadas seguindo métodos padrão.
6. Reforço adicional se necessário: Se o título no 21o dia for inferior às expectativas, uma injeção de reforço adicional com a mesma dose e método pode ser administrada por volta do 28o dia.Os testes de titer podem ser realizados nos dias 28 a 35.Posteriormente, a coleta de sangue integral ou a imunização por desafío de antígeno e a fusão de células do baço podem proceder seguindo os métodos padrão.
Por favor verifique seu email!